DNA退火緩沖液
本Annealing Buffer可以用于DNA oligo退火,不可用于RNA oligo 的退火。退火后產物可以直接和經酶切、純化的質粒連接。通常轉化后可以得到大量的陽性克隆。
DNA退火緩沖液
D0110 DNA退火緩沖液 NobleRyder 5ml 80.00
本公司供應化學試劑的DNA退火緩沖液,*,歡迎洽談。
簡介:本Annealing Buffer可以用于DNA oligo退火,不可用于RNA oligo 的退火。退火后產物可以直接和經酶切、純化的質粒連接。通常轉化后可以得到大量的陽性克隆。
保存條件:
-20℃保存,一年有效。
操作步驟
1. 把要退火的DNA oligo用經滅菌的三蒸水配制成50μM。解凍Annealing Buffer for DNA Oligos(5X),混勻備用。如經常使用,本Buffer可放置2-8℃一個月。
2. 如下設置退火反應體系:
Annealing Buffer for DNA Oligos(5X) | 20μl |
DNA oligo A(50μM) | 20μl |
DNA oligo B(50μM) | 20μl |
Nuclease-Free Water | 40μl |
總體積 | 100μl |
按照上述順序依次加入各種試劑,混勻。放入PCR儀。
3. 如下設置PCR儀進行退火反應:
步驟 | 溫度 | 時間 | 說明 |
1 | 95℃ | 2分鐘 | 讓oligo充分變性 |
2 | 每8秒下降0.1℃,降至25℃(注1) | 約90分鐘 | 退火 |
3 | 4℃ | 長時間保持 | 暫時存放 |
注1:如果所用的PCR儀不具備下降0.1℃的功能,也可以設置為每90秒下降1℃。
4. 退火結束后可以直接用于連接反應,也可以在-20℃凍存備用。如果退火結束后打算進行酶切等其它反應,用純化試劑盒進行純化,或者確保退火產物在反應體系中體積不超過10%,以避免AnnealingBuffer對后續的酶反應體系的干擾。
貨號 | 產品名稱 | 品牌 | 規格 | 價格(元) |
D0963 | 2×Pfu PCR MasterMix (不含染料) | NobleRyder | 1ml/10ml | 160.00/1200.00 |
D0962 | 2×Pfu PCR MasterMix (含染料) | NobleRyder | 1ml/10ml | 160.00/1200.00 |
D0961 | 2×Taq PCR MasterMix (不含染料) | NobleRyder | 1ml/10ml | 80.00/580.00 |
D0960 | 2×Taq PCR MasterMix(含染料) | NobleRyder | 1ml/10ml | 80.00/580.00 |
D0965 | 2×Taq Plus PCR MasterMix (不含染料) | NobleRyder | 1ml/10ml | 120.00/1000.00 |
D0964 | 2×Taq Plus PCR MasterMix (含染料) | NobleRyder | 1ml/10ml | 120.00/1000.00 |
D0110 | DNA退火緩沖液 | NobleRyder | 5ml | 80.00 |
D0973 | dNTP(10mM) | NobleRyder | 1ml | 80.00 |
D0974 | dNTP(2.5mM) | NobleRyder | 1ml | 40.00 |
D0951 | Pfu DNA Polymerase | NobleRyder | 500U/2500U | 180.00/720.00 |
D0033 | SYBR Green I(20×)定量PCR用 | NobleRyder | 1ml | 120.00 |
R0928 | SYBR Green II(10000×) | NobleRyder | 100ul | 520.00 |
D0950 | Taq DNA Polymerase | NobleRyder | 1000U/5000U | 80.00/320.00 |
D0952 | Taq Plus DNA Polymerase | NobleRyder | 500U/2500U | 140.00/560.00 |