NobleRyder 蛋白快速銀染試劑盒
NobleRyder 蛋白快速銀染試劑盒 NobleRyder 即用型液體試劑 P2827-20T
蛋白快速銀染試劑盒
產品簡介:
蛋白快速銀染試劑盒(Protein Fast Silver Stain Kit)是一種快速的可用于SDS-PAGE或非變性PAGE等蛋白銀染染色的試劑盒,該試劑盒含有增敏步驟,可明顯降低背景。其優點還在于:1、操作簡單、快速;2、可用于2D凝膠的銀染,并可進行后續的質樸檢測;3、目的條帶清晰;4、不含甲醇。Protein Fast Silver Stain Kit與Protein Silver Stain Kit相比,前者操作速度更快,但檢測靈敏度可能低于后者,尤其是在檢測小分子量蛋白質的時候。本試劑盒僅用于科研領域,不宜用于臨床診斷或其他用途。
NobleRyder 蛋白快速銀染試劑盒
產品組成:
編號 名稱 | P2827 20T | Storage |
試劑(A): Silver Stain Sensitizer(500×) | 2×1ml | RT |
試劑(B): Silver Stain(100×) | 10ml | RT 避光 |
試劑(C): Silver Stain Developer(5×) | 2×100ml | RT 避光 |
試劑(D): Silver Stain Stop Buffer(10×) | 100ml | RT |
使用說明書 | 1份 |
自備材料:
1.水平搖床或側擺搖床
2.去離子水(超純)
3.乙醇、冰乙酸
操作步驟(僅供參考):
1、準備工作:以下操作以8.5×5.5cm、厚度為1.0mm的凝膠為例,以凝膠全部浸沒到溶液為準,一般用量是25ml,對于凝膠體積較大的,各溶液的使用量需按凝膠體積比例放大。整個銀染過程應在搖床上進行,搖床轉速控制在60~70rpm。提前配制固定液,即按無水乙醇:冰乙酸:去離子水=5:1:4的比例配制。提前配制洗滌液,即按無水乙醇:去離子水=1:4的比例配制。
2、水洗:電泳結束后,取凝膠放入去離子水中清洗2次,每次5min。
3、固定:取凝膠放入50~100ml固定液中,在搖床上室溫搖動15~20min,重復固定步驟1次。
4、洗脫:取凝膠放入洗滌液中清洗2次,每次5min。
5、水洗:去離子水清洗凝膠2次,每次5min。
6、增敏:配制銀染增敏工作液,即取Silver Stain Sensitizer(500×)0.1ml加入到50ml去離子水中,混勻,即1×Silver Stain Sensitizer,一般應2h內用完。室溫下用1×Silver Stain Sensitizer孵育凝膠2min,立即用去離子水清洗凝膠2次,每次1min。
7、銀染:配制銀染工作液,即取Silver Stain(100×)0.5ml加入到50ml去離子水中,混勻,即得1×Silver Stain,一般應2h內用完。取凝膠入1×Silver Stain,在搖床上室溫搖動10~20min。
8、水洗:棄液,在搖床上用去離子水清洗凝膠2次,每次30s,搖動速度在60~70rpm。總的水洗時間應控制在1.5min內。
9、顯影:配制銀染顯影工作液,即取Silver Stain Developer(5×)10ml加入到40ml去離子水中,混勻,即1×Silver Stain Developer,一般應30min內用完。清洗凝膠后,立即置于1×Silver Stain Developer中,室溫孵育2~10min,直至蛋白條帶清晰可見。一般顯色30s后就會出現棕色沉淀,繼續顯影2~3min,亦可延長至5min以上,如果顯影效果不佳,可重新更換1×Silver Stain Developer繼續顯影。
注意事項:
1、背景過深:①顯色時間過長;②洗滌不充分;③凝膠中殘留物質未去除干凈;④去離子水的純度過低。
2、蛋白條帶較淺:①蛋白的半guang氨酸含量過低;②銀染后水洗時間過長;③蛋白量較低;④固定后的洗滌時間不夠,導致乙酸殘留。
3、凝膠上出現雜質或非蛋白的印跡:①凝膠沒有被充分浸沒,應加入足量溶液;②容器沒有清洗干凈;③凝膠接觸金屬物質;④指紋或其他壓跡。
4、本染色液呈酸性,有輕微腐蝕性,使用時請作必要防護。
5、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
有效期: 6個月有效。
NobleRyder 蛋白快速銀染試劑盒